細胞培養(yǎng)入門：基礎培養(yǎng)基知多少？

  培養(yǎng)基為細胞在體外培養(yǎng)提供生長和繁殖所需要營養(yǎng)物質和環(huán)境條件，是生命科學研究中不可或缺工具。培養(yǎng)基按分類分為基礎培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基等，不同培養(yǎng)基對細胞培養(yǎng)作用有截然不同。

  本文將重點介紹基礎培養(yǎng)基。例如，DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是最常用的基礎培養(yǎng)基之一，適合大多數(shù)哺乳動物細胞的生長。深入了解基礎培養(yǎng)基，能夠幫助科研人員在細胞培養(yǎng)過程中選擇合適的培養(yǎng)基進行實驗，從而少走彎路，取得更準確的實驗結果。相關閱讀：《什么是細胞培養(yǎng)基？一文深入了解細胞培養(yǎng)基》

  基礎培養(yǎng)基的種類

  基礎培養(yǎng)基種類繁多，常見的種類包括DMEM、RPMI1640、MEM和199培養(yǎng)基，它們分別用于不同細胞類型和實驗目的。了解不同基礎培養(yǎng)基特點，可以幫助您選擇合適培養(yǎng)基，為細胞培養(yǎng)實驗中奠定基礎。如果您正在選購基礎培養(yǎng)基，上海通蔚提供多種優(yōu)質的基礎培養(yǎng)基，滿足您的不同需求。

  DMEM基礎培養(yǎng)基

  DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是意大利裔美國病毒學家雷納托·杜爾貝科（RenatoDulbecco）改良的Eagle。與原始的Eagle最低必需培養(yǎng)基相比，Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基包含更高的氨基酸和維生素濃度，是其四倍。

  最初的DMEM培養(yǎng)基配方包含較低濃度（1g/L）的葡萄糖和丙酮酸鈉。目前，DMEM培養(yǎng)基有多種配方可供選擇，包括高葡萄糖濃度配方和低葡萄糖濃度配方，以及含有丙酮酸鈉或不含丙酮酸鈉的配方。DMEM培養(yǎng)基采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，在5-10%的CO2環(huán)境中能夠維持細胞所需的生理pH值。為了滿足細胞的生長需求，DMEM培養(yǎng)基通常需要添加胎牛血清（FBS）等添加劑。

  Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基（DMEM）是一種廣泛使用的基礎培養(yǎng)基，可用于支持多種不同的哺乳動物細胞生長。已經在DMEM中成功培養(yǎng)出的細胞包括原代成纖維細胞、神經元、膠質細胞、HUVEC、平滑肌細胞，以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等細胞系。

  RPMI1640基礎培養(yǎng)基

    RPMI1640培養(yǎng)基是以其開發(fā)地點羅斯威爾公園紀念研究所命名的，它是對McCoy5A基因的改良版本，并含有更高濃度的肌醇。RPMI1640培養(yǎng)基的獨特之處在于它含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。與Eagle’sMEM和DMEM不同，RPMI1640培養(yǎng)基包含生物素、維生素B12和PABA。此外，RPMI1640培養(yǎng)基還含有高濃度的肌醇和膽堿。由于RPMI1640培養(yǎng)基不含蛋白質、脂質或生長因子，因此通常需要添加10%胎牛血清(FBS)等添加劑來滿足細胞的生長需求。RPMI1640培養(yǎng)基采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，在5–10%CO2環(huán)境下可以維持細胞所需的生理pH值。

  RPMI1640培養(yǎng)基最初是為懸浮培養(yǎng)人白血病細胞而開發(fā)的，但它被發(fā)現(xiàn)適用于多種哺乳動物細胞，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和癌細胞。RPMI1640培養(yǎng)基在懸浮培養(yǎng)方面表現(xiàn)出色，并且可以支持多種細胞的生長，因此在細胞培養(yǎng)研究中被廣泛應用。為了滿足不同的細胞培養(yǎng)需求，RPMI1640培養(yǎng)基有多種改良配方可供選擇，您可以使用培養(yǎng)基選擇工具查找適合您的配方。

  MEM基礎培養(yǎng)基

    MEM（MinimumEssentialMedium，最低必需培養(yǎng)基）最初由科學家HarryEagle基于他之前設計的Eagle基本培養(yǎng)基（BEM）進行改良和優(yōu)化而來，它將BEM中的成分簡化為更基本的必需營養(yǎng)物質。MEM培養(yǎng)基被稱為"最低必需"，因為它只包含維持細胞基本生長所需的必需營養(yǎng)物質，使細胞能夠在體外環(huán)境下存活和繁殖。與BME相比，MEM培養(yǎng)基含有更高的氨基酸濃度。MEM培養(yǎng)基可以使用厄爾鹽或漢克斯鹽配制，分別用于維持CO2培養(yǎng)箱或大氣環(huán)境下的pH值。由于MEM培養(yǎng)基不含蛋白質、脂質或生長因子，因此通常需要添加胎牛血清（FBS）等添加劑來滿足細胞的生長需求。

    MEM可用于各種懸浮和貼壁的哺乳動物細胞的培養(yǎng)，包括HeLa、BHK-21、293、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纖維細胞和原代大鼠星形膠質細胞等。MEM培養(yǎng)基能夠有效支持多種細胞的生長，并且具有較高的性價比，因此在細胞培養(yǎng)研究中被廣泛應用。

  M199基礎培養(yǎng)基

     Medium199基礎培養(yǎng)基，通常簡稱為M199，是由J.F.Morgan于1950年開發(fā)的一種細胞培養(yǎng)基。最初，M199是為了研究雞胚成纖維細胞的營養(yǎng)需求而開發(fā)的。M199具有廣泛的物種適用性，特別適用于培養(yǎng)非轉化細胞。M199廣泛用于病毒學、疫苗生產以及小鼠胰腺上皮和大鼠晶狀體組織的原代外植體的體外培養(yǎng)。

    與其他基礎培養(yǎng)基相比，M199含有獨特的成分，包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶和多種維生素。M199含有Earle鹽，適用于CO2培養(yǎng)箱。M199不含蛋白質、脂質或生長因子。M199使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)（2.2g/L），因此需要在5-10%CO2環(huán)境下才能維持細胞所需的生理pH值。

  M199培養(yǎng)基在培養(yǎng)非轉化細胞方面表現(xiàn)出色，并且可以支持多種細胞的生長，因此在細胞培養(yǎng)研究中被廣泛應用。

  如何選購基礎培養(yǎng)基

    選擇基礎培養(yǎng)基時，需要綜合考慮細胞類型、實驗目的和成本效益。

    對于購買的新細胞株，可以咨詢出售單位，了解其推薦的培養(yǎng)基信息。

    對于特定實驗所需的細胞，可以查閱相關文獻，參考他人的經驗，根據(jù)細胞株的特點和實驗需求選擇合適的培養(yǎng)基。

    如果缺乏相關文獻支持，可以嘗試使用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目標細胞，觀察其生長狀態(tài)，進行生長曲線或集落形成等指標分析，根據(jù)結果選擇合適的培養(yǎng)基。

    對于重要的實驗，在選擇細胞培養(yǎng)基上，可以選擇一些口碑較好的公司所產的培養(yǎng)基，或者是目標細胞出售單位配套的培養(yǎng)基，一般這樣可以避免由于培養(yǎng)基質量問題帶來的實驗誤差，給實驗的順利進行奠定基礎。

    建議在選擇基礎培養(yǎng)基時，可以參考以下建議：

• 了解常用基礎培養(yǎng)基的特點和適用范圍，例如DMEM、RPMI1640、MEM等。
• 注意培養(yǎng)基的批次差異，建議使用同一批次培養(yǎng)基進行實驗。
• 確保培養(yǎng)基的滅菌質量，建議使用專業(yè)的滅菌設備和方法。

  上述為大家介紹了常見基礎培養(yǎng)基，相信你對基礎培養(yǎng)基有所了解。如果您對基礎培養(yǎng)基還有疑問或者選購，歡迎前來咨詢。