發(fā)布時(shí)間:2024-04-25 發(fā)布作者:通蔚生物
酶聯(lián)免疫試劑盒,全稱為酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay)試劑盒,是一種靈敏、特異的生物分析技術(shù),用于檢測抗原或抗體的生物試劑。在科研實(shí)驗(yàn)中,ELISA試劑盒起著比較關(guān)鍵作用,它可以幫我深入研究各種生物學(xué)現(xiàn)象,推動科研進(jìn)步!
在ELISA實(shí)驗(yàn)中或者選擇購買ELISA試劑盒,了解ELISA試劑盒組成部分及作用比較重要!接下來上海通蔚生物詳細(xì)為大家介紹一下ELISA試劑盒組成部分及作用,幫助您更好了解這些部分在ELISA實(shí)驗(yàn)的作用及在今后選擇合適的ELISA試劑盒。
在了解ELISA試劑盒組成之前,我們先了解下ELISA實(shí)驗(yàn)原理。在ELISA實(shí)驗(yàn)中,抗原或抗體被固定在固相載體(如微孔板)上。其次,加入待檢測樣本,其中的抗原或抗體會與固定在載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。接著,實(shí)驗(yàn)中會引入酶標(biāo)記的二抗。這些二抗能夠識別并結(jié)合已經(jīng)與待檢測分子結(jié)合的抗體,形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物。最后,加入底物后,酶標(biāo)二抗中的酶會催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生可見的顏色變化。
圖1 通蔚ELISA試劑盒
知道原理,我們就詳細(xì)了解下ELISA試劑盒組成,因?yàn)樵戆藢?shí)驗(yàn)用到試劑盒部分,ELISA試劑盒包含如下:
酶標(biāo)板(微孔板)
酶標(biāo)板是由多孔組成(96孔),每個(gè)孔都有一個(gè)潛在窗口,可以透視您的樣本。酶標(biāo)板,材質(zhì)一般為聚苯乙烯,在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中,抗原、抗體和其它生物分子通過多種機(jī)制吸附至酶標(biāo)板表面,然后與受檢樣本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟進(jìn)行反應(yīng),通過酶標(biāo)儀來進(jìn)行檢測。
圖2 96孔酶標(biāo)板
抗原和抗體
抗原和抗體是ELISA試劑盒關(guān)鍵生物分子,抗原和抗體在酶標(biāo)板特異性結(jié)合反應(yīng)解決生物學(xué)科研難題。
酶標(biāo)記抗體
酶標(biāo)記抗體是鏈接特異性抗原識別和信號放大橋梁。它能夠識別并結(jié)合樣品中目標(biāo)抗原上的特定抗原表位,并偶聯(lián)一種酶(例如辣根過氧化物酶 HRP 或堿性磷酸酶 AP),加入底物,酶會催化底物發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生可檢測的信號。
緩沖液
為了提高實(shí)驗(yàn)的可靠性,減少背景干擾。緩沖液有包被緩沖液、封閉緩沖液、樣品稀釋緩沖液、洗滌緩沖液和終止緩沖液。不同的緩沖液其作用也不同,大家可以參考自己購買試劑盒的說明進(jìn)行實(shí)驗(yàn)應(yīng)用。
底物
底物是實(shí)驗(yàn)最后階段,它和沒標(biāo)記抗體反應(yīng)時(shí),實(shí)驗(yàn)的結(jié)果將在酶標(biāo)板上顯出色彩和熒光劑。
圖3 底物顯色
終止液
加入底物發(fā)揮作用之后,您需要一個(gè)方法停止反應(yīng),防止信號增強(qiáng)可能會同時(shí)放大背景信號,降低信噪比,從而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。終止液可以結(jié)束實(shí)驗(yàn)。
陽性和陰性對照樣品
為了保證ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,ELISA試劑盒還為您提供了已知濃度的陽性和陰性對照樣品,以幫助您得出實(shí)驗(yàn)并驗(yàn)證結(jié)果。
說明書
ELISA試劑盒說明書可以為您實(shí)驗(yàn)操作和注意事項(xiàng)進(jìn)行指導(dǎo),確保您實(shí)驗(yàn)的完整性和準(zhǔn)確性。
一個(gè)完整的ELISA試劑盒基本上包含上述的組成,大家拿到試劑盒可以了解這些組成部分。不過大家在選擇試劑盒時(shí)候要注意以下事項(xiàng):
首先,仔細(xì)閱讀試劑盒的說明書是至關(guān)重要的。了解試劑盒的選用方法、組成、方法性能指標(biāo)等信息有助于選擇最適合實(shí)驗(yàn)需求的試劑盒。對于科研工作,應(yīng)選擇參考方法試劑盒;而在醫(yī)療預(yù)防工作中,建議選擇推薦的常規(guī)方法試劑盒或公認(rèn)的測定方法試劑盒。
其次,注意檢查試劑盒是否有衛(wèi)生部的批準(zhǔn)文號。對于已列入衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)體外診斷試劑審批管理范圍的試劑盒,沒有生產(chǎn)批準(zhǔn)文號的,不應(yīng)使用。同時(shí),考察生產(chǎn)廠家的信譽(yù)也是必要的,以確保試劑盒的質(zhì)量和穩(wěn)定性。
最后,根據(jù)實(shí)驗(yàn)規(guī)模和預(yù)算合理選擇試劑盒也是關(guān)鍵。不同品牌和類型的試劑盒價(jià)格可能存在差異,因此需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇。對于實(shí)驗(yàn)規(guī)模較大的情況,可以選擇通用的試劑盒以降低成本;而對于實(shí)驗(yàn)規(guī)模較小的情況,可以選擇專用的試劑盒以提高檢測的準(zhǔn)確性和特異性。
了解酶聯(lián)免疫試劑盒組成及作用,作為科研的小伙伴們讓我們充分利用ELISA為科學(xué)進(jìn)步和人類發(fā)展造福!對于ELISA試劑盒還有疑問,可以尋求通蔚ELISA在線顧問咨詢。通蔚有不同物種的ELISA試劑盒滿足科研需求,高靈敏度和特異性,活動優(yōu)惠多多,歡迎前來選購!