發(fā)布時(shí)間:2023-11-10 發(fā)布作者:上海通蔚生物
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是一種廣泛使用的免疫學(xué)技術(shù),以其靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便、適用范圍廣等特點(diǎn),在臨床診斷、生物研究、食品安全等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。了解ELISA的主要類型及其應(yīng)用有助于更好地理解和使用這一工具。下面由上海生蔚詳細(xì)介紹一下。
直接ELISA是最常用的免疫學(xué)方法之一,主要原理是將特異性抗體直接吸附到固相載體上,再與相應(yīng)的抗原反應(yīng),通過酶標(biāo)抗體顯色,根據(jù)顏色反應(yīng)結(jié)果來判斷樣本中抗原的含量。直接ELISA主要用于檢測(cè)抗原,如病毒、細(xì)菌和其他微生物等。
間接ELISA主要用于檢測(cè)抗體,如人類免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒等抗體檢測(cè)。其原理是將特異性抗原直接吸附到固相載體上,再與相應(yīng)的抗體反應(yīng),通過酶標(biāo)二抗顯色,根據(jù)顏色反應(yīng)結(jié)果來判斷樣本中抗體的含量。間接ELISA也可用于檢測(cè)其他自身抗體,如類風(fēng)濕因子、抗核抗體等。
夾心ELISA主要用于檢測(cè)大分子量蛋白質(zhì)、多肽等,如腫瘤標(biāo)志物、細(xì)胞因子等。其原理是將特異性抗體與酶標(biāo)抗體結(jié)合,再將特異性抗原直接吸附到固相載體上,最后與相應(yīng)的抗體反應(yīng),通過酶標(biāo)二抗顯色,根據(jù)顏色反應(yīng)結(jié)果來判斷樣本中抗原的含量。夾心ELISA具有較高的靈敏度和特異性,適用于低濃度樣本的檢測(cè)。
競(jìng)爭(zhēng)性ELISA主要用于檢測(cè)小分子量物質(zhì),如藥物、毒素等。其原理是將特異性抗體與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合,再將特異性抗原直接吸附到固相載體上,最后與相應(yīng)的抗體反應(yīng),通過酶標(biāo)二抗顯色,根據(jù)顏色反應(yīng)結(jié)果來判斷樣本中抗原的含量。競(jìng)爭(zhēng)性ELISA具有操作簡(jiǎn)便、適用范圍廣等特點(diǎn),在食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
雙抗體夾心ELISA是一種高靈敏度的免疫學(xué)方法,主要用于檢測(cè)細(xì)胞表面抗原、可溶性抗原等。其原理是將兩種特異性抗體分別與酶標(biāo)抗體和固相載體結(jié)合,再將特異性抗原直接吸附到固相載體上,最后與相應(yīng)的抗體反應(yīng),通過酶標(biāo)二抗顯色,根據(jù)顏色反應(yīng)結(jié)果來判斷樣本中抗原的含量。雙抗體夾心ELISA具有較高的靈敏度和特異性,適用于低濃度樣本的檢測(cè)。
六、重組抗原ELISA
重組抗原ELISA是一種基于基因工程技術(shù)制備抗原的方法,可以克服傳統(tǒng)天然抗原的不足,提高抗原的質(zhì)量和穩(wěn)定性。其原理是將目的基因與質(zhì)粒DNA重組后轉(zhuǎn)化到大腸桿菌或其他微生物中表達(dá),再將其純化后作為抗原用于ELISA檢測(cè)。重組抗原ELISA具有更高的特異性和靈敏度,適用于臨床診斷和生物研究等領(lǐng)域。