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【通蔚生物】:告訴您人組胺(HIS)elisa試劑盒是什么

發(fā)布時間:2023-05-12     發(fā)布作者:上海通蔚生物

人組胺(HIS)elisa試劑盒簡介:

組胺是自體活性物質(zhì)之一,在體內(nèi)由組氨酸脫羧基而成,組織中的組胺是以無活性的結(jié)合型存在于肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中,皮膚、支氣管粘膜、腸粘膜和神經(jīng)系統(tǒng)中含量較多。當機體受到理化刺激或發(fā)生過敏反應時,可引起這些細胞脫顆粒,導致組胺釋放,與組胺受體結(jié)合而產(chǎn)生生物效應??菇M胺是拮抗組胺對人體的生物效應,即應用抗組胺藥物。抗組胺受體就是拮抗組胺的H1和H2受體。由于此兩種受體在人體內(nèi)分布不同而產(chǎn)生不同的效應,它是抗組胺藥應用治療疾病的生理藥理基礎。


人組胺(HIS)ELISA試劑盒實驗條件選擇:

(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。

(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。


通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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