胞培養(yǎng)中會出現(xiàn)哪些污染？細(xì)胞培養(yǎng)常見的污染及原因

  細(xì)胞污染會對細(xì)胞后繼培養(yǎng)造成一定問題，了解細(xì)胞常見細(xì)胞污染問題，針對當(dāng)前問題快速判斷是至關(guān)重要！為了讓大家區(qū)分細(xì)胞污染，通蔚針對細(xì)胞常見污染類型進(jìn)行盤點(diǎn)。了解這些常見細(xì)胞污染類型，會后續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞預(yù)防污染打下基礎(chǔ)。

  細(xì)胞培養(yǎng)中會出現(xiàn)哪些污染？

  細(xì)菌污染

  細(xì)菌污染形態(tài)大小在0.5~5μm，形狀呈現(xiàn)球狀或桿狀，形狀規(guī)則，分布不均勻；一般細(xì)胞污染后48-72小時增值爆發(fā)式增值；營養(yǎng)被消耗掉，細(xì)胞培養(yǎng)基變黃，呈渾濁，通過鏡 下觀察，有明顯的定向運(yùn)動。

  處理方法：對于細(xì)胞輕度污染可用10X雙抗清洗處理，如果細(xì)胞較為真貴，可以嘗試離心收集細(xì)胞，用新鮮培養(yǎng)基重懸，并通過0.22μm的濾器過濾除菌，對于重度細(xì)胞污染建議消殺后棄掉。

  真菌污染

  酵母菌和霉菌是兩種常見真菌的形態(tài)。霉菌污染通常呈現(xiàn)為絮狀、絨毛狀或蛛網(wǎng)狀，而酵母菌污染則更像是分散的小顆?；虺蓤F(tuán)的菌落；常見肉眼可見的菌落，真菌污染會導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色發(fā)生各種變化，包括變黃、變綠、變黑、變紫等等；隨著時間的推移，真菌會逐漸擴(kuò)散并污染整個培養(yǎng)體系。真菌會產(chǎn)生孢子，孢子具有很強(qiáng)的抗逆性和傳播性，容易污染其他細(xì)胞。

  處理辦法：真菌污染較難根除，不建議保留，建議消殺后丟棄；由于真菌污染難以清除，預(yù)防更為重要。

  支原體污染

  支原體是目前已知最小的原核生物，在光學(xué)顯微鏡下難以觀察，需要借助電子顯微鏡或特殊染色方法；感染支原體的細(xì)胞，在某一時間點(diǎn)碎片突然增多，還包括細(xì)胞生長變慢、形態(tài)改變（如細(xì)胞變圓、出現(xiàn)空泡）、培養(yǎng)基pH值變化不明顯等；氣溶膠傳播是支原體污染的主要途徑之一，操作過程中的交叉污染也比較常見，支原體污染會對細(xì)胞的生長、代謝和功能產(chǎn)生廣泛的影響，嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果！

  鑒定方法：PCR法、顯色法、熒光染色法、培養(yǎng)法

  處理辦法：若細(xì)胞狀態(tài)尚可，添加支原體抑制劑培養(yǎng)2-3代可轉(zhuǎn)陰；若細(xì)胞狀態(tài)很差，建議消殺后丟棄。預(yù)防勝于治療。嚴(yán)格的無菌操作、定期檢測、使用支原體清除試劑預(yù)防性處理等措施都非常重要。

  黑膠蟲污染

  黑膠蟲無明確定義，在鏡下無法直接觀察到。主要表現(xiàn)為細(xì)胞狀態(tài)差、黑點(diǎn)多或碎片多，布朗運(yùn)動。通過檢測發(fā)現(xiàn)主要為支原體污染，部分為未知增值不明顯支原體污染。

  處理辦法：通過各種檢測方法排除已知的污染，例如支原體、細(xì)菌和真菌。 如果確定是支原體污染，則應(yīng)使用針對性的支原體清除試劑。如果排除了所有已知污染，仍然存在“黑膠蟲”現(xiàn)象，則可以嘗試使用一些廣譜的抗生素或抗真菌藥物，但效果難以保證；若細(xì)胞狀態(tài)很差，建議消殺后丟棄。

  嚴(yán)格的無菌操作、定期清潔和消毒、使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清等，都是減少“黑膠蟲”污染的關(guān)鍵

  上述為大家介紹細(xì)胞常見的污染及原因。通過了解上述細(xì)胞污染及處理方法，確保細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。為了避免細(xì)胞污染，平時在細(xì)胞培養(yǎng)同時，預(yù)防最關(guān)鍵。