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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 ：人外周血白細胞
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
組織來源 ：外周血
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
人外周血白細胞分離自外周血。外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中首次提出外周血這一新概念。白細胞(Leukocyte) ，舊稱白血球，血液中的一類細胞。
根據(jù)白細胞的細胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為中性粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞，白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到，血細胞中體積比較大、數(shù)量比較少，具有細胞核。其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人外周血白細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的人外周血白細胞經(jīng)過檢測，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：懸浮
細胞形態(tài) ：圓形
傳代特性 ：不增殖。不傳代
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2，5%
人外周血白細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
人外周血白細胞是一種懸浮細胞，細胞形態(tài)呈圓形，在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細胞不增殖。不傳代。建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中，用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞。將分散好的細胞調(diào)整合適密度接種至培養(yǎng)器皿中，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 若遇到懸浮細胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2) 中細胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結(jié)束后，加入胰酶抑制劑(或血清) 終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細胞。1200rpm 離心5min，棄上清，收集細胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基，用吸管輕輕吹打混勻。按傳代比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
6) 待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
特殊注意事項
此細胞為懸浮細胞，請注意不要直接倒掉，造成損失。懸浮細胞因多數(shù)胞體較小，離心收集時，請注意懸液中細胞是否收集完全，可適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)或增加離心時間3-5m in，增加細胞獲取量。
