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改良Harris蘇木素染色液
摘要
屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種,適用于細(xì)胞核染色,尤其適用于臨床紙片染色。
產(chǎn)品介紹
改良Harris蘇木素染色液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡(jiǎn)稱HE染色，是病理學(xué)和組織學(xué)常用的一種染色方法。蘇木 精為堿性天 然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木 精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。
改良Harris蘇木素染色液是經(jīng)典的Harris蘇木素染色法的改進(jìn)。該染色液不含汞，無毒，無氧化膜，細(xì)胞核染色質(zhì)著色深而細(xì)微，臨床上常替代Harris蘇木素染色液，染色時(shí)間一般5～8min。其特點(diǎn)是蘇木素被氧化的程度高，染色力強(qiáng)，雖然染色時(shí)間短，但是易使細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、纖維過染，染色后需要鹽酸乙醇分化，屬于退行性染色。
染色原理：
細(xì)胞核染色的原理：
蘇木素為堿性天 然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是
DNA，在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。
細(xì)胞漿染色的原理：
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在一 定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細(xì)胞漿的染色與染液的
pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7～5.0)以下時(shí)，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細(xì)胞漿帶正電荷，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細(xì)胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。
分化作用：
染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個(gè)過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。
返藍(lán)作用：
分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán)，但所需時(shí)間較長(zhǎng)。
