【通蔚生物】：豬圓環(huán)病毒3型染料法熒光定量PCR試劑盒原理介紹

豬圓環(huán)病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料?，F(xiàn)將其原理簡述如下:

1.TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時，Taq酶的5'- 3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進行基因定量分析，又可分析基因突變(SNP)，有望成為基因診斷和個體化用藥分析的*技術(shù)平臺。

2.SYBR熒光染料:在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地參入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結(jié)合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應(yīng)是否特異。

3.分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，導(dǎo)致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近，不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后，退火過程中，分子信標中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光。

熒光定量PCR服務(wù):

簡介:實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR試劑盒技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用PCR試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求:

(01）請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA (大于5ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于5ug/樣品)。
(02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

(03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料:DNA/RNA來源等

2、熒光定量PCR操作程序

(o1）引物(探針)設(shè)計與合成。
(03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

(04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

上海通蔚生物科技有限公司自成立以來，一向以“優(yōu)異的產(chǎn)品，優(yōu)惠的報價和交心的服務(wù)”得到廣闊新老客戶的必定和支撐，不斷提高自身的專業(yè)技術(shù)水平和服務(wù)質(zhì)量，為您提供非常好的產(chǎn)品。