總抗壞血酸(TAA)含量測(cè)定(紅菲咯啉法)微板法/96樣
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
總抗壞血酸(TAA)包括還原型和脫氫型抗壞血酸,其中脫氫抗壞血酸被還原為還原型抗壞血酸,接著還原型抗壞血酸把三價(jià)鐵離子還原成二價(jià)鐵離子,二價(jià)鐵離子與紅菲咯啉反應(yīng)生成紅色絡(luò)和物,在 534nm 處有特征吸收峰,顏色深淺與還原型抗壞血酸含量成正比,繼而計(jì)算得出總抗壞血酸的含量。
試劑盒組成和配制:
試劑名稱 |
規(guī)格 |
保存要求 |
備注 |
提取液 |
液體100mL×1瓶 |
4℃保存 |
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試劑 a |
液體 5mL×1 瓶 |
4℃保存 |
用前甩幾下或4℃離心使試劑落入試管底部,再加入15ml的25%硫酸,混勻,4℃保存。 |
試劑 b |
液體 40mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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試劑 c |
液體 10mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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試劑一 |
液體 30mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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試劑二 |
A:液體×1支 試劑瓶B(空瓶) |
4℃保存 |
試劑二 B 液配制:臨用前取出0.047mLA 液至試劑瓶 B 中,再加9.953mL無(wú)水乙醇,混勻備用。 |
試劑三 |
粉體 mg×1 瓶 |
4℃保存 |
用前甩幾下使粉體落入底部,再加 13mL 無(wú)水乙醇混勻溶解(該試劑難溶,可超聲溶解)。 |
試劑四 |
液體 5mL×1 瓶 |
4℃保存 |
溶液為淡黃色。 |
標(biāo)準(zhǔn)品 |
粉劑×2 支 |
4℃保存 |
臨用前:每支用前甩幾下標(biāo)準(zhǔn)品管,使粉劑落入底部,再加入1mL試劑一混勻溶解 , 即 得1mg/mL,再用試劑一稀釋100倍為 0.01mg/mL 溶液即為標(biāo)準(zhǔn)液(現(xiàn)配現(xiàn)用)。 |
所需的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、96 孔板、研缽、冰、低溫離心機(jī)、無(wú)水乙醇、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
總抗壞血酸(TAA)含量測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!