測(cè)定規(guī)格:48樣
有 效 期:6個(gè)月
測(cè)定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
腺苷脫氨酶(ADA,EC 3.5.4.4)是一種琉基酶,是嘌呤核苷酸代謝的關(guān)鍵酶,與機(jī)體細(xì)胞的免疫活性有重要關(guān)系。腺苷脫氨酶(ADA)催化腺嘌呤核苷水解,產(chǎn)生次黃嘌呤核苷和氨,利用氨在強(qiáng)堿的環(huán)境下與次氯酸鹽和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚藍(lán),溶液顏色穩(wěn)定。其在 630nm 處有特征吸收峰,通過(guò)檢測(cè)氨增加的速率,即可計(jì)算該酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。
腺苷脫氨酶(ADA)活性測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品母液(10μg/mL 的氨(分子量是 18)),把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
2. 按照顯色反應(yīng)階段的測(cè)定管加樣體系操作,根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。