ELISA試劑盒

PCR試劑盒

生化試劑盒

細(xì)胞系

細(xì)胞庫(kù)

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

完全培養(yǎng)基

原代細(xì)胞

細(xì)胞專用培養(yǎng)基

菌株

生化試劑

病理染色液

科研抗體

非洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒

規(guī)格：

數(shù)量：

購(gòu)買(mǎi)數(shù)量

品牌 : 通蔚生物
目錄號(hào) : TW39384
應(yīng)用 : 僅供科研使用
保存條件 : 低溫/避光保存
貨期 : 現(xiàn)貨
商品庫(kù)存：100

非洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒

產(chǎn)品及特點(diǎn)：

非洲柑桔黃龍病菌（Candidatus Liberobacter Africanum）是一種類菌體，柑桔感染黃龍病后，全年均可發(fā)生，一般以夏梢和秋梢發(fā)病最多，其次是春梢。新梢的癥狀是葉片表現(xiàn)黃化和黃綠相間的斑駁。在葉片凋落后，枝梢上新長(zhǎng)出的葉片表現(xiàn)缺素狀的花葉。病梢變短、生勢(shì)衰弱，病葉黃厚、變小，且易脫落，形成枯枝。開(kāi)花不適時(shí)，花開(kāi)的多、落得多。果小而畸形，或紅鼻果。后期，根部往往表現(xiàn)為小根腐爛。此菌可以侵染蕓香科柑橘屬和金橘屬植物，引發(fā)癥狀。在田間未見(jiàn)枳發(fā)病，僅枳橙發(fā)病。通過(guò)菟絲子，此菌可以侵染長(zhǎng)春花。在自然界，蕓香科蠔殼刺屬和木蘋(píng)果屬植物可能受此菌侵染，九里香屬植物常見(jiàn)著生大量傳播柑橘黃龍病的柑橘木虱，但其體內(nèi)未見(jiàn)病原菌。，因此非洲柑桔黃龍病菌檢測(cè)具有重要的意義。本試劑盒根據(jù)熒光定量PCR原理開(kāi)發(fā)，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供DNA模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增非洲柑桔黃龍病菌，與其他病原沒(méi)有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。

規(guī)格及成分：

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃色）
試劑三	非洲柑桔黃龍病菌 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	非洲柑桔黃龍病菌 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8 /μL）	50 μL（黃蓋）
試劑五	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存：

低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。

自備試劑：

樣品DNA。

使用方法：

一、樣品 DNA 的制備：

1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容?？梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。

2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 非洲柑桔黃龍病菌 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)：

3. 對(duì)N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：

成份	N+2 個(gè)樣品管	PCR 陰性對(duì)照	PCR陽(yáng)性對(duì)照
PCR Magic Mix 3.0	各 20μL	20μL	20μL
非洲柑桔黃龍病菌PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2個(gè)樣品DNA模板	各18μL	--	--
PCR 陰性對(duì)照（水）	--	18μL	--
PCR 陽(yáng)性對(duì)照（非洲柑桔黃龍病菌PCR陽(yáng)性對(duì)照1000倍稀釋液）	--	--	18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過(guò)程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR 反應(yīng)35個(gè)循環(huán)	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	40 sec
最后延伸	72℃	7 min

三、電泳檢測(cè)：

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。

四、特別提示：

本公司的所有產(chǎn)品，僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

021-54845833/15800441009