hFOB1.19人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :人SV 40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 :hFO B1.19
細(xì)胞別稱 :hFO B1.19;hFO B
細(xì)胞形態(tài) :多細(xì)胞形態(tài)
生長特性 :貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 :空氣,95% ;CO2,5% 34℃
凍存條件 :55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 :DM EM /F12(P M 150312)+0.3m g/mlG 418(PB 180125)+10%F B S(164210-50)+1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時間 :1~ 2分鐘
換液頻次 :2~ 3次/周
傳代比例(密度) :1:3-1:4
細(xì)胞背景描述
hFO B1.19細(xì)胞是在0.6m g/m L新霉素G 418存在下,用溫度敏感的表達(dá)載體pU C SVisA 58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織建立的細(xì)胞系。在許可溫度33.5℃下細(xì)胞分裂很快,而在限制溫度39.5℃下細(xì)胞極少分裂或不分裂。hFO B 1.19細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力;hFO B 1.19細(xì)胞提供了一個同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng),用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化、造骨細(xì)胞生理和激素、生長因子和對造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。
供體年齡 :胚胎
組織來源 :骨;成骨細(xì)胞;以SV 40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染
細(xì)胞類型 :條件永生化細(xì)胞
抗原表達(dá) :SV 40T antigen
基因表達(dá) :alkaline phosphatase
細(xì)胞保藏中心 :ATCC ; C R L-11372
生物安全等級 :2[Cellscontain SV40viralseq u en ces]
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?xì)胞有疑問,請及時跟我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)??筛覀兊募夹g(shù)支持交流。