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021-54845833/15800441009
產品簡介
產品名稱 ： 大鼠牙胚細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 牙胚組織
產品規(guī)格 ： 5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介
大鼠牙胚細胞分離自牙胚組織。牙胚是牙齒最開始發(fā)育階段的形態(tài)，是由牙板向深層的結締組織內伸延，在其最末端細胞增生，進一步發(fā)育成牙胚。牙胚有三部分組成：
① 成釉器(enam elorgan)，起源于口腔外胚層，形成釉質。
② 牙乳頭(dentalpapilla)，起源于外胚層間充質，形成牙髓和牙本質。
③ 牙囊(dentalsac)，起源于外胚層間充質，形成牙骨質、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的發(fā)生是口腔上皮和外胚間充質相互作用的結果。在胚胎的第5周，覆蓋在原口腔的上皮由兩層細胞組成，外層是扁平上皮細胞，內層為矮柱狀的基底細胞。
在未來的牙槽突區(qū)，深層的外胚層間充組織誘導上皮增生，開始僅在上下頜弓的特定點上，上皮局部增生，很快增厚的上皮相互連接，依照頜骨的外形形成一馬蹄形上皮帶，稱為原發(fā)性上皮帶。在胚胎的第7周，這一上皮帶繼續(xù)向深層生長，并分裂為兩個：向頰(唇)方向生長的上皮板稱前庭板，位于舌(腭)側的上皮板稱為牙板(dentalla mina)。在胚胎的第8~10周，前庭板繼續(xù)向深層生長，與發(fā)育的牙槽嵴分開，前庭板表面上皮變性，形成口腔前庭溝。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠牙胚細胞采用膠原酶消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠牙胚細胞經檢測，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、HBV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態(tài) ： 梭形、多角形
傳代特性 ： 可傳3代左右
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣，95% 。C O2，5%
大鼠牙胚細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法
大鼠牙胚細胞是一種貼壁細胞，細胞形態(tài)呈梭形、多角形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳3代左右。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養(yǎng)瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1m g/m l），明膠（0.1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
