產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 : 大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
組織來(lái)源 : 腎上腺組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介
大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞分離自腎上腺組織;腎上腺是人體相當(dāng)重要的內(nèi)分泌器官,由于位于兩側(cè)腎臟的上方,故名腎上腺。腎上腺左右各一,位于腎的上方,共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形,右腎上腺為三角形。從側(cè)面觀察,腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分,周圍部分是皮質(zhì),內(nèi)部是髓質(zhì)。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分,分泌腎上腺素和去甲腎上腺素。這些激素在應(yīng)激狀態(tài)釋放增多,能夠幫助升高血壓,加快心率,升高血糖,動(dòng)員全身的儲(chǔ)備物質(zhì),為機(jī)體與外界環(huán)境的抗?fàn)幾骱贸浞譁?zhǔn)備。
腎上腺外部是皮質(zhì)部分,分泌醛固酮、皮質(zhì)醇和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進(jìn)小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收,正常數(shù)量的醛固酮,對(duì)維持人體正常血壓有重要作用。但是如果過(guò)多分泌,會(huì)導(dǎo)致高血壓和低血鉀。皮質(zhì)醇是人體必需的激素之一。當(dāng)人體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí),比如感冒,發(fā)燒,遇到突發(fā)事件的時(shí)候,腎上腺皮質(zhì)分泌大量的皮質(zhì)醇,這些皮質(zhì)醇能夠動(dòng)員機(jī)體的存儲(chǔ)能源,為應(yīng)對(duì)內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準(zhǔn)備。當(dāng)皮質(zhì)醇缺乏時(shí),機(jī)體在遇到重大事件的時(shí)候,往往缺乏足夠應(yīng)對(duì)能力,容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產(chǎn)生的雄激素,對(duì)男性來(lái)講,并非必不可少,但是對(duì)女性而言,是雄激素的一個(gè)重要來(lái)源。
方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。
質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞經(jīng)3β-H SD 免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 : 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 梭形、多角形
傳代特性 : 可傳1-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
使用方法
大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈梭形、多角形,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳1-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)最佳;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn);包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。