如今,細(xì)胞培養(yǎng)成為生命科學(xué)不可或缺一部分。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,使細(xì)胞生存、生長(zhǎng)和繁殖的技術(shù)。它為我們了解細(xì)胞的功能、研究疾病的機(jī)制、開(kāi)發(fā)新的藥物和治療方法提供了重要的平臺(tái)。如果您也開(kāi)始做細(xì)胞培養(yǎng),下面內(nèi)容對(duì)您有一定的幫助!
選擇合適的培養(yǎng)基
培養(yǎng)基為細(xì)胞提供生長(zhǎng)環(huán)境,不同的細(xì)胞類型對(duì)培養(yǎng)基的種類和添加劑等條件有不同的要求。常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12。在細(xì)胞培養(yǎng)之前,通蔚建議大家可以查一下ATCC細(xì)胞庫(kù)或者查文獻(xiàn),找到適合自己的培養(yǎng)液是非常關(guān)鍵的!因此,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程找到合適的培養(yǎng)液是成功第一步!相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)液區(qū)別可以參考:《
dmem和1640的區(qū)別》
了解細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)性
每種細(xì)胞都有自己的生長(zhǎng)習(xí)性,了解細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)性對(duì)于細(xì)胞密度控制和傳代起著關(guān)鍵的作用。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性問(wèn)題。
選擇優(yōu)質(zhì)的胎牛血清
大家在做細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,有些細(xì)胞需要依賴細(xì)胞生長(zhǎng)因子,比如一些特殊類型的細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等,在體外培養(yǎng)時(shí)也需要添加特定的生長(zhǎng)因子才能存活和生長(zhǎng)。因此,大家在選擇胎牛血清,要選擇一些優(yōu)質(zhì)的胎牛血清。關(guān)于牛血清,可以參考《小牛血清與新生牛血清區(qū)別》
圖1 胎牛血清
及時(shí)傳代和更換培養(yǎng)液
上述介紹過(guò)細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)性,如果一些細(xì)胞增長(zhǎng)一定的密度后,會(huì)發(fā)生接觸抑制,導(dǎo)致生長(zhǎng)速率下降,甚至細(xì)胞死亡,就要及時(shí)傳代,同時(shí)要根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度及密度及時(shí)更換培養(yǎng)液,維持細(xì)胞的健康成長(zhǎng)。具體可以根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的類型予以調(diào)整。
無(wú)菌環(huán)境
細(xì)胞培養(yǎng)要求在無(wú)菌環(huán)境下,細(xì)胞培養(yǎng)皿中一旦混入細(xì)菌,細(xì)菌會(huì)快速生長(zhǎng),將迅速占領(lǐng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)細(xì)胞前功盡棄!因此,重要話說(shuō)三遍,無(wú)菌環(huán)境...
圖2 無(wú)菌培養(yǎng)
細(xì)心呵護(hù)和觀察
如果您做到上述幾點(diǎn),細(xì)胞培養(yǎng)工作可以開(kāi)展,但是并不是萬(wàn)事大吉。平時(shí)要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行觀察,因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)難免會(huì)出現(xiàn)一些意想不到的結(jié)果。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng),初期一天觀察2次,如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,及時(shí)解決,這樣才能養(yǎng)一盤“漂亮”的細(xì)胞。
上述通蔚為大家介紹“做細(xì)胞培養(yǎng)你應(yīng)該知道的”,也希望通過(guò)上文了解,在今后科研實(shí)驗(yàn)中養(yǎng)好自己的細(xì)胞。